Результаты использования медицинской технологии определения наиболее частых анеуплоидий методом многолокусной количественной флуоресцентной ПЦР

Хромосомные аномалии являются частой причиной невынашивания беременности или в случае, если изменения кариотипа совместимы с жизнью, рождения детей с тяжелыми пороками развития. Хромосомное исследование при неразвивающейся беременности дает возможность установить причину потери беременности и провести объективное консультирование супружеской пары. В настоящее время для выявления нарушений кариотипа наряду со стандартным метафазным анализом используются методы сравнительной геномной гибридизации, интерфазного FISH-анализа, количественной флуоресцентной ПЦР и мультиплексной лигазной реакции. Преимуществом методов, основанных на количественной флуоресцентной ПЦР, является их быстрота, экономичность и отсутствие жестких требований к исследуемому материалу. В работе представлены результаты ДНК-диагностики 1239 внутриутробно погибших зародышей с использованием медицинской технологии, представляющей собой эффективный экспресс-метод выявления количественных аномалий генетического материала посредством амплификации последовательностей высокополиморфных микросателлитных локусов ДНК с флуоресцентно мечеными олигонуклеотидными праймерами. В диагностическую панель включены восемь хромосом, числовые аномалии которых наиболее часто встречаются в абортивном материале, а также приводят к рождению детей с тяжелыми пороками развития. В группе внутриутробно погибших зародышей нарушения хромосомного набора обнаружены в 418/1239 образцах (34%). Наиболее частым типом хромосомных аномалий явились трисомии по исследуемым аутосомам, совокупная частота которых составила 62,7% (262 образца) и полные триплоидии - 22% (93 образца). Среди трисомий преобладали нарушения по хромосомам 16 и 22 (102 и 64 случая соответственно). Моносомии по аутосомам были представлены незначительно, их суммарная частота составила 4%. Моносомия Х-хромосомы была выявлена в 28 случаях (6,7%). В 14 образцах были определены сочетанные трисомии по двум аутосомам.

невынашивание беременности, хромосомные аномалии, анеуплоидии, количественная флуоресцентная ПЦР, miscarriage, chromosomal abnormalities, aneuploidy, quantitative fluorescent PCR

1. О.Г. Чиряева, Л.И. Петрова, Н.А. Садик, В.С. Дудкина, А.А. Пендина, И.Д. Федорова, Т.В. Кузнецова, В.С. Баранов. Цитогенетический аналих хориона при неразвивающейся беременности. Журнал акушерства и женских болезней. 2007; (1): 35-45.

2. В.А.Тимошевский, И.Н. Лебедев. Молекулярные методы быстрого кариотипирования в практике пренатальной диагностики клинически значимых анеуплоидий. Сборник «Молекулярно-биологические технологии в медицинской практике». 2009; (13), «Альфа Виста Н», Новосибирск.

3. Hulten M. A., Dhanjal S. and Pertl B. Rapid and simple prenatal diagnosis of common chromosome disorders: advantages and disadvantages of the molecular methods FISH and QF-PCR. Reproduction. 2003; (126): 279-297.

4. Mann K., Fox S.P., Abbs S., Yau S.C., Scriven P.N., Docherty Z., Ogilvie C.M. Development and implementation of a new rapid aneuploidy diagnostic service within the UK National Health Service and implications for the future of prenatal diagnosis. The Lancet. 2001; (358): 1057-1061.

5. Миньженкова М.Е., Шилова Н.В., Маркова Ж.Г., Козлова Ю.О., Золотухина Т.В. Эффективность различных методов диагностики хромосомных аномалий при репродуктивных потерях //Медицинская генетика. 2014; (2): 25-30.

6. Иванов М.А., Стрельников В.В., Литвиненко М.В., Торганова И.Г., Немцова М.В. Преимплантационная экспресс-диагностика распространенных анеуплоидий на основе количественной флуоресцентной мультилокусной ПЦР. Медицинская генетика. 2005; (5): 194.

7. Diego-Alvarez, D., Garcia-Hoyos, M., Trujillo, M. J., et. al. Application of quantitative fluorescent PCR with short tandem repeat markers to the study of aneuploidies in spontaneous miscarriages. Human Reproduction, 2005, 20(5), 1235-1243.

8. Zou, G., Zhang, J., Li, X.W., He, L., He, G., Duan, T. Quantitative fluorescent polymerase chain reaction to detect chromosomal anomalies in spontaneous abortion. International Journal of Gynecology & Obstetrics, 2008, 103(3), 237-240.

9. Donaghue, C., Mann, K., Docherty, Z., Mackie Ogilvie, C. (2005). Detection of mosaicism for primary trisomies in prenatal samples by QF-PCR and karyotype analysis. Prenatal diagnosis, 25(1), 65-72.

10. Jenderny, J. (2014). Chromosome aberrations in a large series of spontaneous miscarriages in the German population and review of the literature. Molecular cytogenetics, 7(1), 38.

11. McClelland, L. S., Allen, S. K., Larkins, et al. (2011). Implementation and experience of an alternative QF-PCR and MLPA diagnostic strategy to detect chromosomal abnormalities in fetal and neonatal pathology samples. Pediatric and Developmental Pathology, 14(6), 460-468.

12. Moftah, R., Marzouk, S., El-Kaffash, D., et.al. (2013). QF-PCR as a molecular-based method for autosomal aneuploidies detection. Advances in Reproductive Sciences, 1(03), 21.

13. Donaghue, C., Mann, K., Docherty, Z., Mazzaschi, R., Fear, C., Ogilvie, C. (2010). Combined QF-PCR and MLPA molecular analysis of miscarriage products: an efficient and robust alternative to karyotype analysis. Prenatal diagnosis, 30(2), 133.

14. Hardy, K., Hardy, P. J. (2015). 1st trimester miscarriage: four decades of study. Translational pediatrics, 4(2), 189.

15. van den Berg, M. M., van Maarle, M. C., van Wely, M., Goddijn, M. (2012). Genetics of early miscarriage. Biochimica et Biophysica Acta (BBA)-Molecular Basis of Disease, 1822(12), 1951-1959.