Влияния окисленной внеклеточной ДНК на повреждение ДНК и активацию транскрипции генов, регулирующих репарацию ДНК и апоптоз в клетках линии астроцитомы человека
Аннотация
В работе исследовали влияние окисленной внеклеточной ДНК (овкДНК) на повреждение геномной ДНК и активацию транскрипции генов, регулирующих репарацию ДНК и процессы апоптоза в клетках астроцитомы человека линии 1321NI. Фрагменты овкДНК добавляли в среду культивирования клеток в концентрации 50-100 нг/мл на 0,5-24 часа. Уровни окислительных повреждений и двунитевых разрывов ДНК ядер, экспрессии белков BCL2, BAX определяли с помощью антител к 8-окси-7,8-дигидрогуанозину (8oxodG), фосфорилированной форме гистона H2AX (γH2AX), белкам BCL2 и BAX, соответственно, используя метод проточной цитофлуориметрии. Уровень экспрессии генов BCL2, ВАХ, BRCA1, BRCA2, ТВР (контроль) оценивали методом ПЦР в реальном времени. Воздействие на клетки 1321NI 50-100 нг/мл овкДНК в течение 30-60 мин приводило к 2-4-кратному повышению уровня 8-охоdG (р < 0,01, уровень двунитевых разрывов увеличивался в 3-3,5 раза (р < 0,01), а экспрессия генов репарации повреждений BRCA1 и BRCA2 возрастала в 3-5 раз (р<0,001). Позже, через 5-24 часа после воздействия на клетки овкДНК, в 3,5-5 раз увеличивалось отношение экспрессии генов BCL2/BAX по сравнению с нестимулированными культурами (p<0,001). Таким образом, в клетках астроцитомы овкДНК индуцирует и перестройку генома, и адаптивные реакции транскриптома, c последующей активацией анти-апоптотического процесса в клетках. Предполагается, что тем самым овкДНК может способствовать накоплению резистентных к лечению мутантных клонов в резидуальной опухоли, провоцируя рецидивы.
Об авторах
А. Ш. Назаретян
ФГБНУ «Медико-генетический научный центр имени академика Н.П. Бочкова»; ФГАОУ ВО «Российский Национальный исследовательский медицинский университет имени Н.И. Пирогова»
Россия
Россия
Е. М. Малиновская
ФГБНУ «Медико-генетический научный центр имени академика Н.П. Бочкова»
Россия
Россия
А. Д. Филев
ФГБНУ «Медико-генетический научный центр имени академика Н.П. Бочкова»; НИИ общей реаниматологии имени В.А.Неговского ФГБНУ «Федеральный научно-клинический центр реаниматологии и реабилитологии»
Россия
Россия
Е. С. Ершова
ФГБНУ «Медико-генетический научный центр имени академика Н.П. Бочкова»; НИИ общей реаниматологии имени В.А.Неговского ФГБНУ «Федеральный научно-клинический центр реаниматологии и реабилитологии»
Россия
Россия
Н. Н. Вейко
ФГБНУ «Медико-генетический научный центр имени академика Н.П. Бочкова»
Россия
Россия
В. М. Писарев
НИИ общей реаниматологии имени В.А.Неговского ФГБНУ «Федеральный научно-клинический центр реаниматологии и реабилитологии»
Россия
Россия
А. С. Халанский
ФГБНУ «Научно-исследовательский институт морфологии человека»
Россия
Россия
Л. В. Каменева
ФГБНУ «Медико-генетический научный центр имени академика Н.П. Бочкова»
Россия
Россия
В. Ю. Табаков
ФГБНУ «Медико-генетический научный центр имени академика Н.П. Бочкова»
Россия
Россия
М. С. Конькова
ФГБНУ «Медико-генетический научный центр имени академика Н.П. Бочкова»
Россия
Россия
С. В. Костюк
ФГБНУ «Медико-генетический научный центр имени академика Н.П. Бочкова»; НИИ общей реаниматологии имени В.А.Неговского ФГБНУ «Федеральный научно-клинический центр реаниматологии и реабилитологии»
Россия
Россия
Рецензия
Для цитирования:
Назаретян А.Ш., Малиновская Е.М., Филев А.Д., Ершова Е.С., Вейко Н.Н., Писарев В.М., Халанский А.С., Каменева Л.В., Табаков В.Ю., Конькова М.С., Костюк С.В. Влияния окисленной внеклеточной ДНК на повреждение ДНК и активацию транскрипции генов, регулирующих репарацию ДНК и апоптоз в клетках линии астроцитомы человека. Медицинская генетика. 2020;19(6):96-99.
For citation:
Nazaretyan A.S., Malinovskaya E.M., Filev A.D., Ershova E.S., Veiko N.N., Pisarev V.M., Khalansky A.S., Kameneva L.V., Tabakov V.Y., Konkova M.S., Kostyuk S.V. Oxidized extracellular DNA affects DNA damage and transcription of genes regulating DNA repair and apoptosis in human astrocytoma cells. Medical Genetics. 2020;19(6):96-99. (In Russ.)
Просмотров: 272
Послать статью по эл. почте 