Распространение реципрокных анеуплоидий на преимплантационном этапе развития на основе данных молекулярного кариотипирования внеклеточной ДНК бластоцисты

Актуальность: Сравнительный анализ молекулярных кариотипов внеклеточной ДНК из внутриполостной жидкости, внутренней клеточной массы и трофэктодермы бластоцисты позволяет зарегистрировать феномен реципрокных анеуплоидий. Это дает возможность определить источник происхождения числовых хромосомных нарушений, а также предположить механизмы их возникновения, связанные с постзиготическими ошибками сегрегации хромосом. Цель: Оценка частоты реципрокных анеуплоидий у эмбрионов человека на стадии бластоцисты. Материалы и методы: CGH-анализ 14 эмбрионов человека на 5 день развития с разделением на внутреннюю клеточную массу, трофэктодерму и внутриполостную жидкость. Результаты: При сравнении молекулярных кариотипов ДНК из внутриполостной жидкости, внутренней клеточной массы и трофэктодермы обнаружено, что у 64% эмбрионов имелись от 1 до 3 реципрокных анеуплоидий (9/14). В формирование реципрокных аномалий были вовлечены хромосомы 19 (33%), 16 (27%), 17, 21, 22 (по 13%). Частота реципрокных анеуплоидий в расчете на пару гомологичных хромосом, полученная на основе сравнительного анализа молекулярных кариотипов внеклеточной ДНК, внутренней клеточной массы и трофэктодермы, составила 24% (16/67); при сравнении внеклеточной ДНК и внутренней клеточной массы - 21% (14/67), внеклеточной ДНК и трофэктодермы - 3% (2/67), а при сравнении внутренней клеточной массы и трофэктодермы - 10% (7/67). Выводы: Использование внеклеточной ДНК из полости бластоцисты в качестве источника дополнительной информации о хромосомной конституции эмбриона позволяет на 56% повысить вероятность выявления реципрокных анеуплоидий, отражающих интенсивность постзиготических митотических ошибок сегрегации хромосом.

внеклеточная ДНК, хромосомный мозаицизм, внутриполостная жидкость бластоцисты, внутренняя клеточная масса, трофэктодерма, реципрокные анеуплоидии, extracellular DNA, chromosomal mosaicism, intracavitary fluid, inner cell mass, trophectoderm, reciprocal aneuploidy

1. Palini S, Galluzzi L, De Stefani S et al. Genomic DNA in human blastocoele fluid. Reprod. Biomed. Online. 2013; 26(6): 603-610.

2. Chow JF, Yeung WS, Lau EY et al. Array comparative genomic hybridization analyses of all blastomeres of a cohort of embryos from young IVF patients revealed significant contribution of mitotic errors to embryo mosaicism at the cleavage stage. Reprod. Biol. Endocrinol. 2014; 12(1): 105.

3. Lebedev I Mosaic aneuploidy in early fetal losses. Cytogenetic and genome research. 2011; 133(2-4): 169-183.

4. Fragouli E, Alfarawati S, Spath K et al. The origin and impact of embryonic aneuploidy. Human genetics. 2013; 132(9): 1001-1013.

5. Kalousek DK Confined placental mosaicism and uniparental disomy. Funct. Dev. Morph. 1994; 4(2): 93-98.

6. Gianaroli L, Magli MC, Pomante A et al. Blastocentesis: a source of DNA for preimplantation genetic testing. Results from a pilot study. Fertil. Steril. 2014; 102(6): 1692-1699.

7. Tobler KJ, Zhao Y, Ross R et al. Blastocoel fluid from differentiated blastocysts harbors embryonic genomic material capable of a whole-genome deoxyribonucleic acid amplification and comprehensive chromosome microarray analysis. Fertil. Steril. 2015; 104(2): 418-425.