Создание мышиной модели мукополисахаридоз-плюс синдрома с использованием CRISPR-Cas9 технологии

Аннотация

Мукополисахаридоз-плюс синдром (МПСПС) – аутосомно-рецессивное заболевание, вызванное миссенс вариантом в гене VPS33A. Целью работы является создание мышиной модели МПСПС путем введения целевого варианта с использованием технологии геномного редактирования CRISPR-Cas9. Донорами спермы и ооцитов служили мыши линии C57BL/6J. Внедрение CRISPR-Cas9 системы проведено методом электропорации. Рождение помета наблюдали на 19-21 дни. Валидация успешного внедрения варианта проводилась методами ПЦР-ПДРФ и секвенирования по Сэнгеру. В результате была получена одна мышь (мужская особь), в геном которой был внедрен вариант p.R500W в гене Vps33a. После нескольких скрещиваний были получены гетерозиготные и гомозиготные мыши. Гомозиготные мыши отставали в развитии. Возможно, это связано с влиянием варианта на внутриутробное развитие.