medgenМедицинская генетикаMedical Genetics2073-7998Publishing House «Genius Media» LLC10.25557/2073-7998.2025.11.114-115medgen-3320Research ArticleКРАТКОЕ СООБЩЕНИЕBRIEF REPORTСоздание мышиной модели мукополисахаридоз-плюс синдрома с использованием CRISPR-Cas9 технологииEstablishment of a mouse model of mucopolysaccharidosis-plus syndrome using CRISPR-Cas9 technologyСофроноваВ. М.SofronovaV.

677000, Якутск, ул. Белинского, д. 58

58, Belinsky st. Yakutsk, 677000

viksofmax92@gmail.comОтомоТ.OtomoT.

701-0192, Курасики

701-0192, Kurashiki

ФГАОУ ВО Северо-Восточный федеральный университет имени М.К. АммосоваРоссияM.K. Ammosov North-Eastern Federal UniversityRussian FederationМедицинская школа КавасакиЯпонияKawasaki Medical SchoolJapan2025241220252411114115Copyright © Софронова В.М., Отомо Т., 20252025Софронова В.М., Отомо Т.Sofronova V., Otomo T.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.medgen-journal.ru/jour/article/view/3320

Мукополисахаридоз-плюс синдром (МПСПС) – аутосомно-рецессивное заболевание, вызванное миссенс вариантом в гене VPS33A. Целью работы является создание мышиной модели МПСПС путем введения целевого варианта с использованием технологии геномного редактирования CRISPR-Cas9. Донорами спермы и ооцитов служили мыши линии C57BL/6J. Внедрение CRISPR-Cas9 системы проведено методом электропорации. Рождение помета наблюдали на 19-21 дни. Валидация успешного внедрения варианта проводилась методами ПЦР-ПДРФ и секвенирования по Сэнгеру. В результате была получена одна мышь (мужская особь), в геном которой был внедрен вариант p.R500W в гене Vps33a. После нескольких скрещиваний были получены гетерозиготные и гомозиготные мыши. Гомозиготные мыши отставали в развитии. Возможно, это связано с влиянием варианта на внутриутробное развитие.

Mucopolysaccharidosis-plus syndrome (MPSPS) is an autosomal recessive disease caused by a missense variant in the VPS33A gene. The aim of this work is to create a mouse model of MPSPS by introducing the target variant using CRISPR-Cas9 technology. Sperm and oocyte donors were mice of the C57BL/6J strain. The CRISPR-Cas9 system was introduced by electroporation. Litter birth was observed on days 19-21. Validation of successful variant introduction was performed by PCR-RFLP and Sanger sequencing. This resulted in one mouse (male) in which the p.R500W variant in the Vps33a gene was introduced into the genome. After several crosses, heterozygous and homozygous mice were obtained. Homozygous mice were developmentally retarded. This may be due to the influence of the variant on intrauterine development.

мукополисахаридоз-плюс синдромген VPS33Aгеномное редактированиемышиная модельmucopolysaccharidosis-plus syndromegene VPS33Agenome editingmouse modelРабота выполнена в рамках Государственного задания Министерства науки и высшего образования Российской Федерации (FSRG-2024-0001)This study was supported by the Ministry Education and Science of Russian Federation (Project No. FSRG-2024-0001)ReferencesKondo H., Maksimova N., Otomo T., et al. Mutation in VPS33A affects metabolism of glycosaminoglycans: a new type of mucopolysaccharidosis with severe systemic symptoms. Human Molecular Genetics. 2017;26(1):173-183.Kondo H., Maksimova N., Otomo T., et al. Mutation in VPS33A affects metabolism of glycosaminoglycans: a new type of mucopolysaccharidosis with severe systemic symptoms. Human Molecular Genetics. 2017;26(1):173-183.Truett G.E., Heeger P., Mynatt R.L., et al. Preparation of PCR-quality mouse genomic DNA with hot sodium hydroxide and tris (HotSHOT). Biotechniques. 2000;29(1):52-54.Truett G.E., Heeger P., Mynatt R.L., et al. Preparation of PCR-quality mouse genomic DNA with hot sodium hydroxide and tris (HotSHOT). Biotechniques. 2000;29(1):52-54.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.