Исследование влияния таргетной терапии на восстановление функционального CFTR-канала у пациента с генотипом E403D/CFTRdele2,3

Введение. Муковисцидоз (МВ) – системное наследственное заболевание, обусловленное мутацией гена CFTR и характеризующееся поражением желез внешней секреции, тяжелыми нарушениями функций органов дыхания. Считается, что при «тяжелом» генотипе клинические проявления более выражены и рано манифестируют. Вариант E403D включен в список вариантов, чувствительных к терапии CFTR модуляторами (ивакафтор-тезакафтор-элексакафтор). Однако их применение для лечения пациентки – носителя варианта E403D, не привело к ожидаемому эффекту.

Методы. Проведен анализ истории болезни пациента с МВ с генотипом E403D/CFTRdele2,3. Для определения разности кишечных потенциалов (ОРКП) и форсколинового теста на кишечных органоидах использовался биопсийный материал прямой кишки. ДНК для секвенирования выделялась из лейкоцитов венозной крови.

Результаты. У пациентки (девочка 11 лет) с генотипом E403D/CFTRdele2,3 диагноз установлен при неонатальном скрининге.  Методом ОРКП выявлена сниженная функция CFTR-канала до старта терапии CFTR модулятором. По данным форсколинового теста на кишечных органоидах показано, что количество функционального белка на апикальной мембране кишечного эпителия не увеличивается при действии как потенциатора, так и корректора у пациентки. Клинически не получено положительной динамики от приема препарата в течение 1,5 лет.

Заключение. Впервые проведен анализ функционального состояния хлорного канала пациента с генотипом E403D/CFTRdele2,3 методом ОРКП до терапии и на терапии CFTR модулятором. Показана связь тяжелых проявлений болезни с отсутствием функции хлорного CFTR канала как по данным потового теста, так и по отсутствию ответа на форсколин при ОРКП. Форсколининдуцированное набухание кишечных органоидов показало, что терапия протестированными CFTR-модуляторами не может быть рекомендована пациенту с вариантом E403D в компаунд-гетерозиготном состоянии с вариантом I или VII класса.

1. Национальный консенсус «Муковисцидоз: определение, диагностические критерии, терапия». Кондратьева Е.И., Каширская Н.Ю., Капранов Н.И., ред. М.: Боргес; 2018.

2. De Boeck K. Cystic fibrosis in the year 2020: A disease with a new face. Acta Paediatr. 2020;109(5): 893–899.

3. Fajac I., De Boeck K. New horizons for cystic fibrosis treatment. Pharmacol. Ther. 2017; 170: 205–211.

4. Mall M.A., Mayer-Hamblett N., Rowe S.M. Cystic Fibrosis: Emergence of Highly Effective Targeted Therapeutics and Potential Clinical Implications. Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2020; 201: 1193–1208.

5. Bierlaagh M.C., Muilwijk D., Beekman J.M., van der Ent C.K. A new era for people with cystic fibrosis. Eur. J. Pediatr. 2021; 180: 2731–2739.

6. Middleton P.G., Mall M.A., Drevinek P. et al. ElexacaftorTezacaftor-Ivacaftor for Cystic Fibrosis with a Single Phe508del Allele. N. Engl. J. Med. 2019; 381: 1809–1819.

7. Fajac I., Sermet I. Therapeutic Approaches for Patients with Cystic Fibrosis Not Eligible for Current CFTR Modulators. Cells. 2021; 10: 2793.

8. Sullivan S.K., Agellon L.B., Schick R. Identification and partial characterization of a domain in CFTR that may bind cyclic nucleotides directly. Curr Biol. 1995;5(10):1159-67.

9. Bihler H., Sivachenko A., Millen L., et al. In vitro modulator responsiveness of 655 CFTR variants found in people with cystic fibrosis. J Cyst Fibros. 2024;23(4):664-675.

10. Burgel P.R., Southern K.W., Addy C., et al. Standards for the care of people with cystic fibrosis (CF); recognising and addressing CF health issues. J Cyst Fibros. 2024;3(2):187-202.

11. Derichs N., Sanz J., Von Kanel T. et al. Intestinal current measurement for diagnostic classification of patients with questionable cystic fibrosis: validation and reference data. Thorax. 2010; 65 (7): 594-599.

12. Мельяновская Ю. Л., Кондратьева Е. И., Куцев С. И. Определение референтных значений для метода определения разности кишечных потенциалов в Российской Федерации. Медицинский вестник Северного Кавказа. 2020;15(2):162-166.

13. Регистр пациентов с муковисцидозом в Российской Федерации. 2023 год. Ред. Амелина Е.Л., Каширская Н.Ю., Кондратьева Е.И., Красовский С.А., Старинова М.А., Воронкова А.Ю., Гинтер Е.К. М.: ИД «МЕДПРАКТИКА-М», 2025, 70 с.

14. Kondratyeva E., Bulatenko N., Melyanovskaya Y., et al. Personalized Selection of a CFTR Modulator for a Patient with a Complex Allele [L467F;F508del]. Curr Issues Mol Biol. 2022;44(10):5126-5138.

15. Булатенко Н.В., Ефремова А.С., Бухарова Т.Б., и др. Исследование остаточной функции хлорного канала CFTR у пациента с генотипом CFTRdele2,3/E403D на модели кишечных органоидов. Гены и Клетки. 2020; 15 (3S): 128-129.

16. Bergougnoux A., Billet A., Ka C., et al. The multi-faceted nature of 15 CFTR exonic variations: Impact on their functional classification and perspectives for therapy. J Cyst Fibros. 2023;22(3):515-524.

17. Bihler H., Sivachenko A., Millen L., et al. In vitro modulator responsiveness of 655 CFTR variants found in people with cystic fibrosis. J Cyst Fibros. 2024;23(4):664-675.