Мутационный статус генов BRAF, NRAS в опухолевом материале пациентов с диагнозом меланома кожи

Меланома − это одно из самых опасных злокачественное заболеваний кожи с высоким риском метастазирования и возникновения рецидивов. Исследования генетических и молекулярных характеристик меланомы имеют важное значение для разработки новых стратегий лечения. Целью данного исследования была оценка мутационного статуса генов BRAF, NRAS в опухолевом материале пациентов с диагнозом меланома кожи. Всего в исследование были включены 54 пациента с подтвержденным диагнозом меланома: мужчин было 36% (n=15), а женщин 64% (n=39). Средний возраст на момент постановки диагноза составил 56 лет. ДНК выделяли из тканей опухоли, фиксированных в формалине и заключённых в парафин (FFPE) с использованием коммерческого набора QIAamp DNA FFPE Tissue Kit (QIAGENE, Германия). Анализ мутации V600E гена BRAF осуществляли методом аллель-специфичной ПЦР в реальном времени с обратной транскрипцией, были проанализированы кодоны 597–601. Методом классической ПЦР (C1000 Touch BioRad, USA) с последующим прямым секвенированием по Сэнгеру (ABI Prism 3500, Applied Biosystems, USA) в гене NRAS были исследованы экзоны 2 и 3. Статистический анализ данных проводили с помощью программы Statistica 7,0. Мутации в гене BRAF были выявлены в 42,6% образцов (мутация V600E 37,1%, V600K 5,4%), а в гене NRAS − в 14,8% (Q61K 7%). В остальных случаях (42,6%) не было обнаружено изменений ни в одном из проанализированных генов. Мутационный статус был тесно связан с анатомическим расположением опухоли. В группе с мутациями в генах BRAF и NRAS (65,3% и 37,0% соответственно; p=0,002) чаще отмечали пациентов с кожным первичным поражением головы и шеи. Митотическую активность чаще обнаруживали в первичных опухолях у пациентов с мутациями в гене NRAS, чем у пациентов с мутациями в гене BRAF (p =0,002).  

1. Schadendorf D., Fisher D.E., Garbe C., et al. Melanoma. Nature reviews. Disease primers, 2015;1:15003. https://doi.org/10.1038/nrdp.2015.3

2. Delyon J., Lebbe C., Dumaz N. Targeted therapies in melanoma beyond BRAF: targeting NRAS-mutated and KIT-mutated melanoma. Current opinion in oncology, 2020;32(2):79–84. https://doi.org/10.1097/CCO.0000000000000606

3. Murphy B.M., Terrell E.M., Chirasani V.R., et al. Enhanced BRAF engagement by NRAS mutants capable of promoting melanoma initiation. Nature communications, 2022:13(1):3153. https://doi.org/10.1038/s41467-022-30881-9

4. Heppt M.V., Siepmann T., Engel J., et al. Prognostic significance of BRAF and NRAS mutations in melanoma: a German study from routine care. BMC cancer, 2017;17(1):536. https://doi.org/10.1186/s12885-017-3529-5

5. Wellbrock C., Karasarides M., Marais R. The RAF proteins take centre stage. Nature reviews Molecular cell biology, 2004;5(11):875-885.

6. Mandalà M., Voit C. Targeting BRAF in melanoma: biological and clinical challenges. Critical reviews in oncology/hematology, 2013;87(3):239–255. https://doi.org/10.1016/j.critrevonc.2013.01.003

7. Jakob J.A., Bassett R.L. Jr., Ng C.S., et al. NRAS mutation status is an independent prognostic factor in metastatic melanoma. Cancer, 2012;118(16):4014–4023. https://doi.org/10.1002/cncr.26724

8. Ugurel S., Thirumaran R.K., Bloethner S., et al. B-RAF and N-RAS mutations are preserved during short time in vitro propagation and differentially impact prognosis. PloS one, 2007;2(2):e236. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0000236

9. Devitt B., Liu W., Salemi R., et al. Clinical outcome and pathological features associated with NRAS mutation in cutaneous melanoma. Pigment cell & melanoma research, 2011;24(4):666–672. https://doi.org/10.1111/j.1755-148X.2011.00873.x

10. Zhang S., Xie R., Zhong A., et al. Targeted therapeutic strategies for melanoma. Chinese medical journal, 2023. https://doi.org/10.1097/CM9.0000000000002692

11. Bauer J., Büttner P., Murali R., et al. BRAF mutations in cutaneous melanoma are independently associated with age, anatomic site of the primary tumor, and the degree of solar elastosis at the primary tumor site. Pigment Cell Melanoma Res. 2011;24(2):345-351. doi:10.1111/j.1755-148X.2011.00837.x