Муковисцидоз: современные возможности диагностики и лечения на основе молекулярного патогенеза

Введение. Муковисцидоз - наследственное аутосомно-рецессивное заболевание. Современные методы ДНК-диагностики открывают возможность для внедрения новых эффективных методов лечения муковисцидоза, в основе которых воздействие на молекулярный патогенез заболевания. Персонализированный подход к оказанию медицинской помощи пациентам с муковисцидозом с учетом генетического профиля с применением новых технологий ДНК-диагностики позволил поднять на новый уровень оказание медико-генетической помощи отягощенным семьям и более эффективно проводить лечебные мероприятия. Цель исследования: реализация программы молекулярно-генетической диагностики для подбора таргетной терапии при муковисцидозе. Методы. Проанализированы данные за всё время проведения неонатального скрининга на муковисцидоз в Республике Башкортостан. В 2021 году в регистре больных муковисцидозом в Республике Башкортостан состояло 94 пациента. Большинству требовалось проведение ДНК диагностики для верификации мутаций в гене CFTR с последующим назначением таргетной терапии. На первом этапе исследований 94 пациентам с муковисцидозом, а также их родственникам проведён анализ с использованием мультиплексной лигазо-зависимой амплификации зондов (SALSA MLPA Probemix P091 CFTR, MRC Holland). На следующем этапе проведено секвенирование всех экзонов гена CFTR методами секвенирования нового поколения (NGS) и Сэнгера. Результаты. Проведен поиск мутаций у 94 пробандов и выявлено 36 патогенных вариантов в гене CFTR. На 2,6% хромосом мутации не обнаружены, на 97,3% хромосомах мутации идентифицированы. У 89 пациентов установлены обе мутации (83,66%), у 5 пробандов обнаружена только одна мутация в гетерозиготном состоянии. У одного пациента диагноз муковисцидоз по итогам исследования снят. Разработка и внедрение новейших технологий секвенирования позволили существенно расширить знания о молекулярных механизмах муковисцидоза, что способствует развитию новых подходов к терапии и проведению новых исследований.

муковисцидоз, неонатальный скрининг, ДНК-диагностика, трансмембранный регулятор проводимости муковисцидоза, CFTR, таргетная терапия

1. Регистр больных муковисцидозом в Российской Федерации. 2018 год. Под редакцией Е.Л. Амелиной, Н.Ю. Каширской, Е.И. Кондратьевой, С.А. Красовского, М.А. Стариновой, А.Ю. Воронковой.- М.: ИД «МЕДПРАКТИКА-М», 2020, 68 с.

2. Butnariu L.I., Țarcă E., Cojocaru E., Rusu C., Moisă Ș.M., Leon Constantin M.M., Gorduza E.V., Trandafir L.M. Genetic Modifying Factors of Cystic Fibrosis Phenotype: A Challenge for Modern Medicine J. Clin. Med. 2021, 10(24), 5821; https://doi.org/10.3390/jcm10245821

3. Муковисцидоз. Издание 2-е., переработанное и дополненное (под редакцией Н.Ю.Каширской, Н.И.Капранова и Е.И.Кондратьевой). - М.: ИД «МЕДПРАКТИКА-М», 2021, 680 с.

4. Капранов Н.И., Каширская Н.Ю., Ашерова И.К., Кондратьева Е.И., Шерман В.Д. Исторические и современные аспекты муковисцидоза в России. Педиатрическая фармакология. 2013;10(6):53-60. https://doi.org/10.15690/pf.v10i6.896

5. Национальный консенсус (2 -е издание) «Муковисцидоз: определение, диагностические критерии, терапия»2018/ Под редакцией Е.И. Кондратьевой, Н.Ю. Каширской, Н.И. Капранова - М.: ООО «Компания БОРГЕС»., 2018, 356 с.

6. Капранов Н.И., Каширская Н.Ю. Муковисцидоз. Современные достижения и актуальные проблемы. Методические рекомендации. Издание 3-е, переработанное и дополненное. М.: ООО «4ТЕ Арт»; 2008. 124 с.

7. Толстова В.Д., Каширская Н.Ю., Капранов Н.И. Массовый скрининг новорожденных на муковисцидоз в России. Фарматека. 2008;1:38-43

8. Wainwright C.E., Elborn J.S., Ramsey B.W., Marigowda G., Huang X., Cipolli M., Colombo C., Davies J.C., De Boeck K., Flume P.A., Konstan M.W., McColley S.A., McCoy K., McKone E.F., Munck A., Ratjen F., Rowe S.M., Waltz D., Boyle M.P.; TRAFFIC Study Group; TRANSPORT Study Group. Lumacaftor-Ivacaftor in Patients with Cystic Fibrosis Homozygous for Phe508del CFTR. N Engl J Med. 2015;373(3):220-31. doi: 10.1056/NEJMoa1409547.

9. Shaw M., Khan U., Clancy J.P., Donaldson S.H., Sagel S.D., Rowe S.M., Ratjen F. Changes in LCI in F508del/F508del patients treated with lumacaftor/ivacaftor: Results from the prospect study. J Cyst Fibros. 2020;19(6):931-933. doi: 10.1016/j.jcf.2020.05.010.

10. Chevalier B., Hinzpeter A. The influence of CFTR complex alleles on precision therapy of cystic fibrosis. J Cyst Fibros. 2020;19(Suppl 1):S15-S18. DOI:10.1016/j.jcf.2019.12.008

11. Baatallah N., Bitam S., Martin N., et al. Cis variants identified in F508del complex alleles modulate CFTR channel rescue by small molecules. Hum Mutat. 2018; 39:506-14. DOI: 10.1002/humu.23389

12. Кондратьева Е.И., Амелина Е.Л., Чернуха М.Ю., и др. Обзор клинических рекомендаций «Кистозный фиброз (муковисцидоз)» 2020. Пульмонология. 2021; 31(2):135-146. DOI: 10.18093/0869-0189-2021-31-2-135-146

13. Амелина Е.Л., Ефремова А.С., Мельяновская Ю.Л., и др. Использование функциональных тестов для оценки остаточной активности канала CFTR и индивидуального подбора эффективных CFTR-модуляторов для лечения пациентов с муковисцидозом с «мягким» и «тяжёлым» генетическими вариантами. Пульмонология. 2021;31(2):167-176

14. Ефремова А.С., Мельяновская Ю.Л., Булатенко Н.В., и др. Описание редких аллелей гена CFTR при муковисцидозе с помощью функциональных тестов и форсколинового теста на ректальных органоидах. Пульмонология. 2021;31(2):178-188

15. Куцев С.И., Ижевская В.Л., Кондратьева Е.И. Таргетная терапия при муковисцидозе. Пульмонология. 2021; 31(2): 226-236. DOI:10.18093/0869-0189-2021-31-2-226-236