medgenМедицинская генетикаMedical Genetics2073-7998Publishing House «Genius Media» LLCmedgen-198Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯORIGINAL RESEARCHРезультаты использования медицинской технологии определения наиболее частых анеуплоидий методом многолокусной количественной флуоресцентной ПЦРResults of the use of the medical technology to determine the most frequent aneuploidies by multilocus quantitative fluorescent PCRСтрельниковВ. В.StrelnikovV. V.vstrel@list.ruКузнецоваЕ. Б.KuznetsovaE. B.noemail@neicon.ruИвановМ. А.IvanovM. A.noemail@neicon.ruЗемляковаВ. В.ZemlyakovaV. V.noemail@neicon.ruЗалетаевД. В.ZaletaevD. V.noemail@neicon.ruМедико-генетический научный центрРоссияResearch Centre for Medical GeneticsRussian FederationМедико-генетический научный центр; Первый московский государственный медицинский университет им. И.М. СеченоваРоссияResearch Centre for Medical Genetics; I.M. Sechenov First Moscow State Medical UniversityRussian FederationПервый московский государственный медицинский университет им. И.М. СеченоваРоссияI.M. Sechenov First Moscow State Medical UniversityRussian Federation20163001201715103444Copyright © Стрельников В.В., Кузнецова Е.Б., Иванов М.А., Землякова В.В., Залетаев Д.В., 20172017Стрельников В.В., Кузнецова Е.Б., Иванов М.А., Землякова В.В., Залетаев Д.В.Strelnikov V.V., Kuznetsova E.B., Ivanov M.A., Zemlyakova V.V., Zaletaev D.V.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.medgen-journal.ru/jour/article/view/198

Хромосомные аномалии являются частой причиной невынашивания беременности или в случае, если изменения кариотипа совместимы с жизнью, рождения детей с тяжелыми пороками развития. Хромосомное исследование при неразвивающейся беременности дает возможность установить причину потери беременности и провести объективное консультирование супружеской пары. В настоящее время для выявления нарушений кариотипа наряду со стандартным метафазным анализом используются методы сравнительной геномной гибридизации, интерфазного FISH-анализа, количественной флуоресцентной ПЦР и мультиплексной лигазной реакции. Преимуществом методов, основанных на количественной флуоресцентной ПЦР, является их быстрота, экономичность и отсутствие жестких требований к исследуемому материалу. В работе представлены результаты ДНК-диагностики 1239 внутриутробно погибших зародышей с использованием медицинской технологии, представляющей собой эффективный экспресс-метод выявления количественных аномалий генетического материала посредством амплификации последовательностей высокополиморфных микросателлитных локусов ДНК с флуоресцентно мечеными олигонуклеотидными праймерами. В диагностическую панель включены восемь хромосом, числовые аномалии которых наиболее часто встречаются в абортивном материале, а также приводят к рождению детей с тяжелыми пороками развития. В группе внутриутробно погибших зародышей нарушения хромосомного набора обнаружены в 418/1239 образцах (34%). Наиболее частым типом хромосомных аномалий явились трисомии по исследуемым аутосомам, совокупная частота которых составила 62,7% (262 образца) и полные триплоидии - 22% (93 образца). Среди трисомий преобладали нарушения по хромосомам 16 и 22 (102 и 64 случая соответственно). Моносомии по аутосомам были представлены незначительно, их суммарная частота составила 4%. Моносомия Х-хромосомы была выявлена в 28 случаях (6,7%). В 14 образцах были определены сочетанные трисомии по двум аутосомам.

Chromosomal abnormalities are a common cause of miscarriage, or if karyotype changes are compatible with life, the birth of children with severe developmental disabilities. Cytogenetic analysis in miscarriages makes it possible to establish the cause of pregnancy loss and to conduct an objective counseling of the couple. At the present time to detect abnormalities of the karyotype, along with the standard metaphase analysis methods comparative genomic hybridization, interphase FISH-analysis, quantitative fluorescent PCR and MLPA are used. The advantage of methods based on fluorescence quantitative PCR is their speed, efficiency and lack of strict requirements for the test material. The results of DNA diagnostics in 1239 embryos who died in utero, using new medical technology which is an effective method of rapid quantitative detection of abnormalities of genetic material by amplification of highly polymorphic microsatellite DNA loci with fluorescently labeled oligonucleotide primers. The diagnostic panel includes eight chromosomes for which numerical abnormalities are most often found in the abortive material, as well as lead to the birth of children with severe developmental disabilities. In miscarried embryos chromosomal abnormalities were found in 418/1239 (34%) samples. The most common type of chromosomal abnormality was trisomy of the autosomes, the cumulative incidence of which amounted to 62.7% (262 samples) and full triploidy - 22% (93 samples). Among trisomies abnormalities of 16 and 22 chromosomes were predominant (64 cases and 102 respectively). Autosomal monosomies were rarely found, with the total rate of 4%. Chromosome X monosomy was detected in 28 (6.7%) cases. In 14 samples we identified combined trisomies of two autosomes.

невынашивание беременностихромосомные аномалиианеуплоидииколичественная флуоресцентная ПЦРmiscarriagechromosomal abnormalitiesaneuploidyquantitative fluorescent PCRReferencesО.Г. Чиряева, Л.И. Петрова, Н.А. Садик, В.С. Дудкина, А.А. Пендина, И.Д. Федорова, Т.В. Кузнецова, В.С. Баранов. Цитогенетический аналих хориона при неразвивающейся беременности. Журнал акушерства и женских болезней. 2007; (1): 35-45.О.Г. Чиряева, Л.И. Петрова, Н.А. Садик, В.С. Дудкина, А.А. Пендина, И.Д. Федорова, Т.В. Кузнецова, В.С. Баранов. Цитогенетический аналих хориона при неразвивающейся беременности. Журнал акушерства и женских болезней. 2007; (1): 35-45.В.А.Тимошевский, И.Н. Лебедев. Молекулярные методы быстрого кариотипирования в практике пренатальной диагностики клинически значимых анеуплоидий. Сборник «Молекулярно-биологические технологии в медицинской практике». 2009; (13), «Альфа Виста Н», Новосибирск.В.А.Тимошевский, И.Н. Лебедев. Молекулярные методы быстрого кариотипирования в практике пренатальной диагностики клинически значимых анеуплоидий. Сборник «Молекулярно-биологические технологии в медицинской практике». 2009; (13), «Альфа Виста Н», Новосибирск.Hulten M. A., Dhanjal S. and Pertl B. Rapid and simple prenatal diagnosis of common chromosome disorders: advantages and disadvantages of the molecular methods FISH and QF-PCR. Reproduction. 2003; (126): 279-297.Hulten M. A., Dhanjal S. and Pertl B. Rapid and simple prenatal diagnosis of common chromosome disorders: advantages and disadvantages of the molecular methods FISH and QF-PCR. Reproduction. 2003; (126): 279-297.Mann K., Fox S.P., Abbs S., Yau S.C., Scriven P.N., Docherty Z., Ogilvie C.M. Development and implementation of a new rapid aneuploidy diagnostic service within the UK National Health Service and implications for the future of prenatal diagnosis. The Lancet. 2001; (358): 1057-1061.Mann K., Fox S.P., Abbs S., Yau S.C., Scriven P.N., Docherty Z., Ogilvie C.M. Development and implementation of a new rapid aneuploidy diagnostic service within the UK National Health Service and implications for the future of prenatal diagnosis. The Lancet. 2001; (358): 1057-1061.Миньженкова М.Е., Шилова Н.В., Маркова Ж.Г., Козлова Ю.О., Золотухина Т.В. Эффективность различных методов диагностики хромосомных аномалий при репродуктивных потерях //Медицинская генетика. 2014; (2): 25-30.Миньженкова М.Е., Шилова Н.В., Маркова Ж.Г., Козлова Ю.О., Золотухина Т.В. Эффективность различных методов диагностики хромосомных аномалий при репродуктивных потерях //Медицинская генетика. 2014; (2): 25-30.Иванов М.А., Стрельников В.В., Литвиненко М.В., Торганова И.Г., Немцова М.В. Преимплантационная экспресс-диагностика распространенных анеуплоидий на основе количественной флуоресцентной мультилокусной ПЦР. Медицинская генетика. 2005; (5): 194.Иванов М.А., Стрельников В.В., Литвиненко М.В., Торганова И.Г., Немцова М.В. Преимплантационная экспресс-диагностика распространенных анеуплоидий на основе количественной флуоресцентной мультилокусной ПЦР. Медицинская генетика. 2005; (5): 194.Diego-Alvarez, D., Garcia-Hoyos, M., Trujillo, M. J., et. al. Application of quantitative fluorescent PCR with short tandem repeat markers to the study of aneuploidies in spontaneous miscarriages. Human Reproduction, 2005, 20(5), 1235-1243.Diego-Alvarez, D., Garcia-Hoyos, M., Trujillo, M. J., et. al. Application of quantitative fluorescent PCR with short tandem repeat markers to the study of aneuploidies in spontaneous miscarriages. Human Reproduction, 2005, 20(5), 1235-1243.Zou, G., Zhang, J., Li, X.W., He, L., He, G., Duan, T. Quantitative fluorescent polymerase chain reaction to detect chromosomal anomalies in spontaneous abortion. International Journal of Gynecology & Obstetrics, 2008, 103(3), 237-240.Zou, G., Zhang, J., Li, X.W., He, L., He, G., Duan, T. Quantitative fluorescent polymerase chain reaction to detect chromosomal anomalies in spontaneous abortion. International Journal of Gynecology & Obstetrics, 2008, 103(3), 237-240.Donaghue, C., Mann, K., Docherty, Z., Mackie Ogilvie, C. (2005). Detection of mosaicism for primary trisomies in prenatal samples by QF-PCR and karyotype analysis. Prenatal diagnosis, 25(1), 65-72.Donaghue, C., Mann, K., Docherty, Z., Mackie Ogilvie, C. (2005). Detection of mosaicism for primary trisomies in prenatal samples by QF-PCR and karyotype analysis. Prenatal diagnosis, 25(1), 65-72.Jenderny, J. (2014). Chromosome aberrations in a large series of spontaneous miscarriages in the German population and review of the literature. Molecular cytogenetics, 7(1), 38.Jenderny, J. (2014). Chromosome aberrations in a large series of spontaneous miscarriages in the German population and review of the literature. Molecular cytogenetics, 7(1), 38.McClelland, L. S., Allen, S. K., Larkins, et al. (2011). Implementation and experience of an alternative QF-PCR and MLPA diagnostic strategy to detect chromosomal abnormalities in fetal and neonatal pathology samples. Pediatric and Developmental Pathology, 14(6), 460-468.McClelland, L. S., Allen, S. K., Larkins, et al. (2011). Implementation and experience of an alternative QF-PCR and MLPA diagnostic strategy to detect chromosomal abnormalities in fetal and neonatal pathology samples. Pediatric and Developmental Pathology, 14(6), 460-468.Moftah, R., Marzouk, S., El-Kaffash, D., et.al. (2013). QF-PCR as a molecular-based method for autosomal aneuploidies detection. Advances in Reproductive Sciences, 1(03), 21.Moftah, R., Marzouk, S., El-Kaffash, D., et.al. (2013). QF-PCR as a molecular-based method for autosomal aneuploidies detection. Advances in Reproductive Sciences, 1(03), 21.Donaghue, C., Mann, K., Docherty, Z., Mazzaschi, R., Fear, C., Ogilvie, C. (2010). Combined QF-PCR and MLPA molecular analysis of miscarriage products: an efficient and robust alternative to karyotype analysis. Prenatal diagnosis, 30(2), 133.Donaghue, C., Mann, K., Docherty, Z., Mazzaschi, R., Fear, C., Ogilvie, C. (2010). Combined QF-PCR and MLPA molecular analysis of miscarriage products: an efficient and robust alternative to karyotype analysis. Prenatal diagnosis, 30(2), 133.Hardy, K., Hardy, P. J. (2015). 1st trimester miscarriage: four decades of study. Translational pediatrics, 4(2), 189.Hardy, K., Hardy, P. J. (2015). 1st trimester miscarriage: four decades of study. Translational pediatrics, 4(2), 189.van den Berg, M. M., van Maarle, M. C., van Wely, M., Goddijn, M. (2012). Genetics of early miscarriage. Biochimica et Biophysica Acta (BBA)-Molecular Basis of Disease, 1822(12), 1951-1959.van den Berg, M. M., van Maarle, M. C., van Wely, M., Goddijn, M. (2012). Genetics of early miscarriage. Biochimica et Biophysica Acta (BBA)-Molecular Basis of Disease, 1822(12), 1951-1959.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.