Актуальность. У эмбрионов человека на преимплантационном этапе развития часто регистрируется явление хромосомного мозаицизма. Это может быть обусловлено особенностями сегрегации хромосом на данном этапе онтогенеза. Использование внеклеточной ДНК из внутриполостной жидкости может способствовать изучению частоты и механизмов возникновения хромосомного мозаицизма в бластоцисте путем анализа кариотипа клеток, подвергшихся апоптозу и недоступных для кариотипирования с применением традиционных технологий цитогенетического исследования. Цель: оценка частоты хромосомного мозаицизма у эмбрионов человека на стадии бластоцисты. Материалы и методы. CGH-анализ 14 эмбрионов человека на 5 день развития с разделением на внутреннюю клеточную массу, трофэктодерму и внутриполостную жидкость. Результаты. Анализ клеток эмбриобласта и трофобласта 14 бластоцист показал, что мозаицизм в каждом эмбрионе наблюдается в среднем по 5 хромосомам. При этом дополнительное использование внеклеточной ДНК приводит к увеличению спектра мозаичных хромосомных аномалий до 7 на образец. Анализ молекулярных кариотипов с использованием внеклеточной ДНК доказывает преимущественную элиминацию клеток с аутосомными моносомия из эмбриобласта. Выводы. Использование внеклеточной ДНК из полости бластоцисты повышает частоту регистрации хромосомного мозаицизма в циклах экстракорпорального оплодотворения и преимплантационной генетической диагностики в основном за счет анеуплоидий, представленных во внутренней клеточной массе бластоцисты.
Actuality: Phenomenon of chromosomal mosaicism often recorded the in human embryos at the preimplantation stage of development. This may be due to features of chromosome segregation at this stage of ontogenesis. The use of extracellular DNA from the intracavitary fluid may contribute to the study of the frequency and mechanisms of occurrence of chromosomal mosaicism in the blastocyst. This is achieved by molecular karyotyping of cells undergoing apoptosis and inaccessible for karyotyping using traditional technologies of cytogenetic studies. Objective: Evaluation the frequency of chromosomal mosaicism in human embryos at the blastocyst stage. Materials and Methods: CGH-analysis of 14 human embryos on day 5 of a division of the inner cell mass, trophectoderm and blastocoel fluid. Results: Comparative analysis of karyotypes of embryoblast and trophoblast of 14 blastocysts revealed that mosaicism in each embryo is observed on average in five chromosomes. Additional use of cell-free DNA leads to increase of spectrum of mosaic chromosomal abnormalities to 7 per sample. Analysis of molecular karyotypes using extracellular DNA proves the predominant elimination of embryoblast cells with autosomal monosomy. Conclusions: The use of extracellular DNA from the cavity of the blastocyst increases the frequency of chromosomal mosaicism registration in the cycles of in vitro fertilization and preimplantation genetic diagnosis. This is accomplished primarily due to the identification of aneuploidies presented in the inner cell mass of the blastocyst.
The authors declare that there are no conflicts of interest present.